Caracterização dos casos confirmados de dengue por meio da técnica de linkage de bancos de dados, para avaliar a circulação viral em Belo Horizonte, 2009-2014 / Características de los casos confirmados de dengue utilizando la técnica de enlace de bases de datos, para evaluar la circulación viral en la ciudad de Belo Horizonte, Brasil, 2009-2014 / Characterization of dengue cases confirmed using the database linkage technique: assessment of virus circulation in Belo Horizonte, Brazil, 2009-2014

Objetivo: descrever a circulação viral de dengue em Belo Horizonte, Brasil, de 2009 a 2014. Métodos: trata-se de estudo de série de casos de dengue infectados por diferentes sorotipos do vírus, identificados por isolamento viral ou RT-PCR; foi realizado linkage das bases de dados do Sistema de Informação de Agravos de Notificação (Sinan), do Sistema de Informações Hospitalares do Sistema Único de Saúde (SIH/SUS) e do Gerenciador de Ambiente Laboratorial (GAL). Resultados: foram relacionados 91,1% dos registros (n=775); entre os casos (n=851), 60,4% (n=514) foram confirmados como DENV-1, 22,1% (n=188) como DENV-4, 9,8% (n=83) como DENV-2 e 7,7% (n=66) como DENV-3; DENV-2 apresentou maior percentual de casos graves (4,5%). Conclusão: DENV-1 prevaleceu e circulou em todos os anos avaliados.

Objetivo: describir la circulación viral del dengue en Belo Horizonte, Brasil, de 2009 a 2014. Métodos: se trata de estudio de una serie de casos de dengue infectados por diferentes serotipos del virus, identificados por aislamiento viral o RT-PCR; se realizó una conexión con las bases de datos del Sistema de Información para Enfermedades de Notificación (Sinan), el Sistema del Información Hospitalaria del Sistema Único de Salud (SIH/SUS) y el Gestor de Ambiente de Laboratorio (GAL). Resultados: fueron relacionados 91,1% de los registros (n=775); entre los casos (n=851), el 60,4% (n=514) fue confirmado como DENV-1, 22,1% (n=188) como DENV-4, 9,8% (n=83) como DENV-2 y 7,7% (n=66) como DENV-3; DENV-2 tuvo un mayor porcentaje de casos graves (4,5%). Conclusión: DENV-1 prevaleció y circuló en todos los años evaluados.

Objective: to describe dengue virus circulation in Belo Horizonte, Brazil, from 2009 to 2014. Methods: this is a series study of cases of dengue infected by different virus serotypes, identified by virus isolation or RT-PCR; database linkage was performed between the Notifiable Health Conditions Information System (SINAN), the Brazilian National Health System Hospital Information System (SIH/SUS) and the Laboratory Environment Manager (GAL). Results: 91.1% of the records were linked (n=775); among the cases (n=851), 60.4% (n=514) were confirmed as DENV-1, 22.1% (n=188) DENV-4, 9.8% (n=83) as DENV-2, and 7.7% (n=66) as DENV-3; DENV-2 accounted for a higher percentage of severe cases (4.5%). Conclusion: DENV-1 prevailed and circulated in all evaluated years.

Surto de toxoplasmose no município de Gouveia, Minas Gerais / Outbreak of toxoplamosis in Goveia, Minas Gerais

Objetivo: investigar surto de toxoplasmose no município de Gouveia-MG, no período entre fevereiro e maio de 2015. Método: foram realizados estudos descritivo e caso-controle, com análise multivariada (regressão logística) e nível de significância de 5%. Definiu-se como caso o indivíduo com toxoplasmose aguda, confirmada laboratorialmente (IgM e/ou IgG reagentes e baixa avidez de IgG), e controle o indivíduo susceptível (IgM e IgG não reagentes). Resultado: o estudo contemplou 50 casos e 68 controles, sendo a maioria dos casos do sexo masculino (43 pacientes, 86%). Os casos tiveram 10 vezes mais chance de tomar água procedente do Manancial (IC95%: 2,8-37,4; p=0,01), 5,1 vezes mais chance de ingerir linguiça (IC95%: 1,2-20,4; p=0,02) e 4,5 vezes mais chance de ser do sexo masculino (IC95%: 1,2-16,7; p=0,02), quando comparados aos controles. Conclusão: foi confirmado um surto de toxoplasmose aguda, em Gouveia - MG, de transmissão hídrica e/ou alimentar. A maior ocorrência no sexo masculino pode estar relacionada a hábitos de risco, envolvidos na transmissão da doença. Foram propostas medidas que resultaram na diminuição e no controle dos casos da doença.

Objective: to investigate the outbreak of toxoplasmosis in the municipality of Gouveia-MG, between February and May 2015. Methods: Descriptive and case control study, with multivariate analysis (logistic regression) and level of significance of 5%. For the purpose of the study, a case was defined on an individual with laboratory which confirmed acute toxoplasmosis (IgM and/or IgG with low IgG avidity) and a control was a susceptible individual (nonreactive IgM and IgG). Results: The study comprised 50 cases and 68 controls, with most cases being male (43 patients, 86%). When compared to controls, cases had 10 times greater odds of having drunk water from Stream A (IC95%: 2,8-37,4; p=0,01), 5,1 times greater odds of having ingested sausage (IC95%: 1,2-20,4; p=0,02) and 4.5 times greater odds of being of male sex (IC95%: 1,2-16,7; p=0,02). Conclusion: A water/foodborne outbreak of acute toxoplasmosis was confirmed in Gouveia-MG, affecting predominantly men. This may be associated with habits regarding disease transmission. Measures that resulted in the reduction and control of cases of this disease have been proposed.

Ocorrência de casos de leishmaniose tegumentar americana: uma análise multivariada dos circuitos espaciais de produção, Minas Gerais, Brasil, 2007 a 2011 / American tegumentary leishmaniasis: a multivariate analysis of the spatial circuits for production of cases in Minas Gerais State, Brazil, 2007 to 2011 / Ocurrencia de casos de leishmaniasis tegumentaria americana: un análisis multivariado de los circuitos espaciales de producción, Minas Gerais, Brasil, 2007 a 2011

O objetivo deste estudo foi explicar a associação dos fatores socioambientais e dos grandes usos da terra com a ocorrência de casos de leishmaniose tegumentar americana (LTA) nos circuitos espaciais de produção, no Estado de Minas Gerais, Brasil. Trata-se de um estudo ecológico do tipo analítico, baseado em dados secundários de casos de LTA dividido por triênio, no período entre 2007 a 2011, cujas unidades de análise foram os municípios pertencentes aos circuitos espaciais. Duas etapas distintas foram realizadas, sendo a elaboração de mapas temáticos com a identificação dos circuitos a primeira, e na segunda etapa um novo indicador casos de LTA por densidade demográfica foi associado com indicadores socioambientais e dos grandes usos da terra submetidos à análise multivariada de componentes principais (ACP). Para o período avaliado, identificou-se três circuitos distribuídos nas mesorregiões Norte de Minas Gerais, Vale do Rio Doce e Região Metropolitana de Belo Horizonte. Houve forte associação dos casos de LTA por densidade demográfica com lavoura temporária, pastagem natural, floresta natural, terras inaproveitáveis e população rural, e uma fraca associação com pastagem plantada. A associação de casos com variáveis dos grandes usos da terra em diferentes perfis agropecuários demonstra o caráter ocupacional da LTA, associado principalmente com trabalhadores da zona rural. A associação da doença com as variáveis ambientais e deficiência das condições de saneamento básico também demonstram relevância no perfil de transmissão nos circuitos espaciais de produção em Minas Gerais.

The aim of this study was to explain the association between social-environmental factors and major land uses and the occurrence of cases of American tegumentary leishmaniasis (ATL) in the spatial circuits of production in Minas Gerais State, Brazil. This was an analytical-type ecological study based on secondary data on ATL divided by three-year period from 2007 to 2011, in which the analytical units were municipalities belonging to the spatial circuits. Two distinct stages were performed. The first was the elaboration of thematic maps with identification of the circuits. In the second, a new indicator, ATL cases by population density, was associated with social-environmental indicators and major land uses, submitted to multivariate principal components analysis (PCA). During the periods studied, three circuits were identified, distributed in the major regions of Northern Minas Gerais, Rio Doce Valley, and Greater Metropolitan Belo Horizonte. There was a strong association between ATL by population density and temporary crops, natural pasture, natural forest, unusable lands, and rural population, and a weak association with planted pasture. The association of cases with the major land uses variable in different agricultural profiles shows the occupational nature of ATL, associated mainly with rural workers. The association of the disease with environmental variables and deficient basic sanitation also proved relevant in the transmission profile in spatial circuits of production in Minas Gerais.

El objetivo de este estudio fue explicar la asociación de los factores socioambientales y explotación a gran escala de la tierra, con la ocurrencia de casos de leishmaniasis tegumentaria americana (LTA) en los circuitos espaciales de producción, en el Estado de Minas Gerais, Brasil. Se trata de un estudio ecológico de tipo analítico, basado en datos secundarios de casos de LTA, dividido por trienios, en el período entre 2007 a 2011, cuyas unidades de análisis fueron los municipios pertenecientes a los circuitos espaciales. Se realizaron dos etapas distintas, consistiendo la primera en la elaboración de mapas temáticos con la identificación de los circuitos, y la segunda etapa en un nuevo indicador de casos de LTA por densidad demográfica, que se asoció con indicadores socioambientales y a dos explotaciones a gran escala de la tierra, sometidos a un análisis multivariado de componentes principales (ACP). Para el período evaluado, se identificaron tres circuitos distribuidos en las mesorregiones del norte de Minas Gerais, Vale do Rio Doce y región metropolitana de Belo Horizonte. Hubo una fuerte asociación de los casos de LTA por densidad demográfica con el trabajo temporal, pasto natural, bosque natural, tierras inaprovechables y población rural, y una escasa asociación con pasto plantado. La asociación de casos con variables de las explotaciones a gran escala de la tierra, con diferentes perfiles agropecuarios, demuestra el carácter ocupacional de la LTA, asociado principalmente a trabajadores de la zona rural. La asociación de la enfermedad con variables ambientales y deficiencia en las condiciones de saneamiento básico, también demuestran relevancia en el perfil de transmisión en los circuitos espaciales de producción en Minas Gerais.

Variability of susceptibility to deltamethrin in peridomestic Triatoma sordida from Triângulo Mineiro, State of Minas Gerais, Brazil

Despite chemical and physical vector control strategies, persistent infestations of Triatoma sordida have been reported in a large part of Minas Gerais, Brazil, and the cause for this is little investigated. We aimed to characterize the deltamethrin toxicological profile in peridomestic T. sordidapopulations from Triângulo Mineiro area of Minas Gerais.

Fatal outcome o infection by dengue 4 in a patent with thrombocytopenic purpuura as a comorbid condition in Brazil / Óbito por dengue 4 no Brasil em paciente com púrpura trombocitopênica idiopática

Dengue is currently a major public-health problem. Dengue virus (DENV) is classified into four distinct serotypes, DENV 1-4. After 28 years of absence, DENV-4 was again detected in Brazil in 2010 in Roraima State, and one year later, the virus was identified in the northern Brazilian states of Amazonas and Pará, followed by Rio de Janeiro and São Paulo. In Minas Gerais, the first confirmed case of DENV-4 occurred in the municipality of Frutal in 2011 and has now been isolated from a growing number of patients. Although DENV-2 is associated with the highest risk of severe forms of the disease and death due to the infection, DENV-4 has also been associated with severe forms of the disease and an increasing risk of hemorrhagic manifestations. Herein, the first fatal case of confirmed DENV-4 in Brazil is reported. The patient was an 11-year-old girl from the municipality of Montes Claros in northern Minas Gerais State, Brazil. She had idiopathic thrombocytopenic purpura as a comorbid condition and presented with a fulminant course of infection, leading to death due to hemorrhagic complications. Diagnosis was confirmed by detection of Dengue-specific antibodies using IgM capture enzyme-linked immunosorbent assay and semi-nested RT-PCR. Primary care physicians and other health-care providers should bear in mind that DENV-4 can also result in severe forms of the disease and lead to hemorrhagic complications and death, mainly when dengue infection is associated with coexisting conditions.

Dengue é atualmente um importante problema de saúde pública. O vírus da dengue (DENV) é classificado em quatro sorotipos distintos, DENV 1-4. Após 28 anos de ausência, o DENV-4 foi detectado novamente no Brasil em 2010 no Estado de Roraima, e um ano depois, o vírus foi identificado em outros estados do norte do país, Amazonas e Pará, seguido pelos estados do Rio de Janeiro e São Paulo. Em Minas Gerais, o primeiro caso confirmado de DENV-4 ocorreu no município de Frutal em 2011 e, desde então, o sorotipo foi isolado em um número crescente de pacientes. Apesar do DENV-2 estar associado a um maior risco de formas graves e morte, o DENV-4 também tem sido associado a casos graves e a risco aumentado de manifestações hemorrágicas. Neste relato, descrevemos o primeiro caso fatal confirmado por DENV-4 no Brasil. A paciente era uma menina de 11 anos do município de Montes Claros, no norte de Minas Gerais, Brasil. Apresentava púrpura trombocitopênica idiopática e evoluiu de forma fulminante durante a infecção por dengue, com óbito associado a complicações hemorrágicas. O diagnóstico foi confirmado pela detecção de anticorpos IgM específicos para dengue, por método imunoenzimático, e por semi-nested RT-PCR. Médicos e outros profissionais de saúde devem estar cientes que infecções por DENV-4 também podem resultar em formas graves da doença com complicações hemorrágicas e óbito, principalmente em pacientes com comorbidades.

Aspectos da vigilância entomológica da doença de chagas no sul do Rio Grande do Sul, Brasil / Aspects of Entomological Surveillance of Chagas disease in southern Rio Grande do Sul, Brazil

Este trabalho teve como objetivo descrever as espécies de triatomíneos presentes na região de abrangência da 3ª Coordenadoria Regional de Saúde do Rio Grande do Sul (3ª CRS) e avaliar aspectos da vigilância entomológica da doença de Chagas desencadeada a partir da notificação de insetos pela população. Para tanto, fez-se o acompanhamento das atividades desenvolvidas pelos agentes no período proposto, sendo também realizadas entrevistas com estes agentes para a identificação das principais dificuldades encontradas durante o andamento das ações do programa. No biênio 2010-2011, foram capturados 295 triatomíneos em nove municípios, todos eles provenientes de capturas realizadas pela população (notificação) e entregues em Postos de Informação de Triatomíneos. Dentre os municípios que obtiveram maior número de capturas, destacaram-se Canguçu (37,8 porcento) e Piratini (28,8 porcento). As espécies com mais exemplares capturados foram Triatoma rubrovaria (93,9 porcento) e Panstrongylus tupynambai (5,1 porcento). As capturas dos insetos ocorreram, predominantemente, no intradomicílio e nos meses de temperatura mais elevada. Quanto aos agentes, 95,2 porcento relataram alguma dificuldade no exercício do ofício, destacando-se as inadequações do transporte e a escassez de material educativo para distribuição pública como principais elementos dificultadores. Concluiu-se que alguns municípios apresentam risco permanente de invasão domiciliar por triatomíneos, especialmente T. rubrovaria. Em razão disso, ficou evidenciada a importância da manutenção das atividades de vigilância e de maior assistência ao trabalho dos agentes que atuam no programa...

The objective of this study was to describe the triatomine species present in the region covered by the 3rd Regional Health Coordination of Rio Grande do Sul (3rd CRS) and evaluate aspects of entomological surveillance of Chagas disease from the notification of insects by the population. For this, the agents’ activities over this period were monitored and they were interviewed to ascertain the main difficulties encountered in the activities of the program. Over this period, 295 triatomines were caught in nine municipalities. All of them were caught by members of the public (notifications) and were handed in at triatomine information centers. Among the municipalities in which larger numbers of specimens were caught, Canguçu (37.8 percent) and Piratini (28.8 percent) were prominent. The species for which the largest numbers of specimens were caught were Triatoma rubrovaria (93.9 percent) and Panstrongylus tupynambai (5.1 percent). The insects were predominantly caught inside homes and during the hotter months. Regarding the agents, 95.2 percent reported that they had some difficulties in carrying out their duties. Inadequacies of transportation and scarcity of educational material for public distribution were cited as the main factors that caused difficulties. It was concluded that some municipalities present an ongoing risk of triatomine invasion in homes, especially regarding T. rubrovaria; maintenance of surveillance activities is of fundamental importance, and greater assistance for the work of agents acting within the program is needed...

Epidemiological characteristics of Brazilian spotted fever in Minas Gerais State, Brazil, 2000-2008 / Aspectos epidemiológicos dos casos de febre maculosa brasileira ocorridos em Minas Gerais, Brasil, 2000 a 2008

Brazilian spotted fever is the most common rickettsiosis in Brazil, most prevalent in the States of São Paulo and Minas Gerais. The aim of this study was to describe the epidemiological characteristics of Brazilian spotted fever in Minas Gerais from 2000 to 2008. Of the 132 cases of Brazilian spotted fever, 53 patients died, representing a case-fatality rate of 40.2 percent. Males predominated, with 78.8 percent of confirmed cases, and median age was 26.5 years. Absence of rash was associated with increased risk of death (p = 0.005). Greater Metropolitan Belo Horizonte, Rio Doce Valley, and Zona da Mata accounted for 70.6 percent of the cases, which occurred mainly from May to November. There was an increase in the number of cases, which could suggest an expansion of the disease, but probably resulted from an increase in the health system's diagnostic capacity and sensitivity. Despite this improvement, the case-fatality rate remains high and with no apparent tendency to decrease, thus indicating the need for improved prevention and patient care.

A febre maculosa brasileira é a rickettsiose mais comum do território nacional, com maior importância nos estados de São Paulo e Minas Gerais. O objetivo deste estudo foi descrever os aspectos epidemiológicos dos casos de febre maculosa brasileira ocorridos em Minas Gerais no período de 2000 a 2008. Dos 132 casos confirmados, 53 evoluíram para óbito, representando uma letalidade de 40,2 por cento. O sexo masculino foi o mais acometido com 78,8 por cento dos casos confirmados, e mediana de idade de 26,5 anos. Entre os fatores de risco determinantes do óbito, a ausência de exantema apresentou associação significativa (p = 0,005). A Região Metropolitana de Belo Horizonte, o Vale do Rio Doce e a Zona da Mata responderam por 70,6 por cento dos casos, que ocorreram principalmente entre os meses de maio e novembro. Houve crescimento no número de casos, que apesar de sugerir expansão da doença, provavelmente decorreu do aumento da capacidade diagnóstica e sensibilidade do sistema de saúde. Apesar dessa melhora, a letalidade permaneceu alta e sem tendências à diminuição, o que implica a necessidade de medidas preventivas e assistenciais.

Vigilância em saúde relacionada à qualidade do ar: identificação dos municípios de risco do estado de Minas Gerais, Brasil, 2008 a 2010 / Health surveillance related to air quality: risk identification of municipalities of Minas Gerais State, Brazil, from 2008 to 2010

O Programa de vigilancia em saude relacionado a qualidade do ar tem como objetivo promover a vigilancia em saude das populacoes expostas aos poluentes atmosfericos. Para a identificacao das areas prioritarias de atuacao e utilizado o Instrumento de Identificacao dos Municipios de Risco (IIMR), com levantamento de dados ambientais e de saude. O objetivo deste trabalho foi caracterizar os municipios do estado de Minas Gerais nos anos de 2008 a 2010, segundo a presenca de fontes fixas e moveis, queima de biomassa, alem da morbimortalidade por doencas respiratorias, utilizando o IIMR. Levando em conta os percentis (25, 75 e 90%) das pontuacoes totais dos municipios, obtidos pelo somatorio dessas variaveis, foi feita a classificacao de risco com os seguintes escores: indice do municipio .18 (baixo risco), 19 a 32 (medio risco), 33 a 38 (alto risco) e .39 (altissimo risco). Segundo a classificacao, 63 municipios foram considerados como de baixo risco, 113 como medio risco, 30 alto risco, e 25 altissimo risco. A metodologia mostrou-se adequada para a priorizacao das areas de atuacao, visto o elevado numero de municipios do estado de Minas Gerais, sendo uma etapa importante para estabelecer acoes efetivas voltadas as populacoes expostas a poluicao do ar.

Avaliação da qualidade do Sistema de Vigilância Epidemiológica de Doença de Chagas Aguda em Minas Gerais, 2005-2008 / Evaluation of the quality System of Epidemiological Surveillance of Acute Chagas Disease in Minas Gerais, 2005-2008

Objetivo: o estudo avaliou a qualidade das notificações de casos agudos de doença de Chagas registrados no sistema de informação utilizado pela vigilância epidemiológica da Secretaria de Estado de Saúde de Minas Gerais, no período de 2005-2008. Metodologia: para avaliação dos registros do sistema de vigilância, adotaram-se as diretrizes do Center for Disease Control and Prevention dos Estados Unidos da América; e para definição e encerramento dos casos, os critérios preconizados pela Secretaria de Vigilância em Saúde do Ministério de Saúde. Resultados: o Sistema de Informação para a vigilância da doença de Chagas é complexo, pouco flexível, com baixa aceitabilidade e, de modo geral, com baixa qualidade dos dados; dos 992 casos notificados no período, 12 (1,2 por cento) apresentavam exame parasitológico direto positivo, critério de confirmação de caso, porém foram descartados em análise posterior por se tratar de casos crônicos; a completitude de preenchimento da maioria dos campos das fichas analisadas foi qualificada entre regular e baixa. Conclusão: é necessária a sensibilização e treinamento dos profissionais da saúde, além de maior integração dos setores responsáveis pelo fluxo de informações, para melhoria da qualidade do registro das notificações, possibilitando a definição de ações de vigilância e estratégias de controle da doença.

Objective: this work aims to evaluate the quality in the registration of acute Chagas disease cases reported to the epidemiologic surveillance of the State of Minas Gerais, Brazil (2005-2008). Methodology: to evaluate the surveillance system registers, the study followed guidance of the Center for Disease Control and Prevention/United States of America; and to define and conclude cases, criteria established by the Health Surveillance Secretariat/Ministry of Health of Brazil. Results: the surveillance system for Chagas disease is complex, inflexible, with low acceptance, and unsatisfying quality of data; from a total of 992 acute cases reported in our given timeframe, only 12 (1.2 per cent) had a positive direct parasitological examination,the defined criteria which single the disease out; however, all the reported cases were, in fact, chronic cases; the majority of fields showed regular to low completeness. Conclusion: it is recommended to invest on training and raising awareness of health professionals in order to improve quality in reports` registration, which makes possible to define strategies andactions for controlling the disease.

The anticancer drug tamoxifen is active against Trypanosoma cruzi in vitro but ineffective in the treatment of the acute phase of Chagas disease in mice

The activity of the antineoplastic drug tamoxifen was evaluated against Trypanosoma cruzi. In vitro activity was determined against epimastigote, trypomastigote and amastigote forms of CL14, Y and Y benznidazole resistant T. cruzi strains. Regardless of the strain used, the drug was active against all life-cycle stages of the parasite with a half maximal effective concentration ranging from 0.7-17.9 µM. Two experimental models of acute Chagas disease were used to evaluate the in vivo efficacy of treatment with tamoxifen. No differences in parasitemia and mortality were observed between control mock-treated and tamoxifen-treated mice.

Caracterização de potenciais alvos moleculares e teste de fármacos candidatos ao tratamento da doença de Chagas experimental / Characterization of potential molecular targets and drug test candidates for the treatment of Chagas disease

No ano de comemoração do centenário de descoberta da doença de Chagas ainda sãomuitos os desafios e as dificuldades na busca de novas alternativas eficazes para otratamento da doença. O objetivo deste trabalho foi caracterizar potenciais alvosmoleculares e testar fármacos candidatos para o tratamento da doença de Chagas. Comoalvos foram analisadas três enzimas: a Tiol Transferase (Tc52), a GlutamatoDesidrogenase (TcGluDH) e a Aldo/ceto Redutase (TcAKR), selecionadas a partir deprévias análises de genômica e proteômica em cepas de Trypanosoma cruzi sensíveis eresistentes ao Benzonidazol. Como potenciais fármacos, foram escolhidos trêsmedicamentos: o Tamoxifeno, a Amiodarona e o Ravuconazol, testados in vitro e in vivo,nas fases aguda e crônica da doença de Chagas experimental. Para os testes in vivo osfármacos foram utilizados isoladamente ou em combinação. Adicionalmente, foi avaliadoo efeito cooperativo do sistema imune na atividade dos inibidores da biossíntese deergosterol, Posaconazol e Ravuconazol. Os resultados mostraram que apenas a TcGluDHfoi diferencialmente expressa, apresentando uma menor expressão da proteína e dorespectivo mRNA nas cepas resistentes ao Benzonidazol em comparação com as cepassensíveis.

Para TcAKR não foi possível completar a caracterização, mas observamos umaumento no nível de mRNA nas cepas resistentes analisadas quando comparada com assensíveis. Não houve correlação entre a expressão da Tc52 e o fenótipo de resistência afármacos do T. cruzi. Nos testes de fármacos, as melhores resultados foram obtidos com aassociação Ravuconazol e Amiodarona: 60% de cura e 90% de sobrevivência doscamundongos infectados e tratados nas fases aguda e crônica. A associação entreAmiodarona e Benzonidazol não gerou efeito sinérgico ou aditivo na cura da doença deChagas experimental. O Tamoxifeno apesar de ter se mostrado potente nos testes in vitrofoi inativo in vivo. Com relação a avaliação da cooperação do sistema imune na atividadedo Posaconazol, nossos resultados mostraram uma nítida influência dos diferentes tipos delinfócitos na atividade desse fármaco assim como para o Benzonidazol. Provavelmente,esse efeito foi devido a ação preferencial desses fármacos sobre diferentes estágios doparasito, em cooperação com diferentes elementos do sistema imune. A utilização decamundongos knockout mostrou que a ausência de Interferon- reduziu a atividade doRavuconazol e Benzonidazol. O presente trabalho abre perspectivas para serem exploradas.

Caracterização de potenciais alvos moleculares e teste de fármacos candidatos ao tratamento da doença de Chagas experimental

No ano de comemoração do centenário de descoberta da doença de Chagas ainda sãomuitos os desafios e as dificuldades na busca de novas alternativas eficazes para otratamento da doença. O objetivo deste trabalho foi caracterizar potenciais alvosmoleculares e testar fármacos candidatos para o tratamento da doença de Chagas. Comoalvos foram analisadas três enzimas: a Tiol Transferase (Tc52), a GlutamatoDesidrogenase (TcGluDH) e a Aldo/ceto Redutase (TcAKR), selecionadas a partir deprévias análises de genômica e proteômica em cepas de Trypanosoma cruzi sensíveis eresistentes ao Benzonidazol. Como potenciais fármacos, foram escolhidos trêsmedicamentos: o Tamoxifeno, a Amiodarona e o Ravuconazol, testados in vitro e in vivo,nas fases aguda e crônica da doença de Chagas experimental. Para os testes in vivo osfármacos foram utilizados isoladamente ou em combinação. Adicionalmente, foi avaliadoo efeito cooperativo do sistema imune na atividade dos inibidores da biossíntese deergosterol, Posaconazol e Ravuconazol. Os resultados mostraram que apenas a TcGluDHfoi diferencialmente expressa, apresentando uma menor expressão da proteína e dorespectivo mRNA nas cepas resistentes ao Benzonidazol em comparação com as cepassensíveis.

Para TcAKR não foi possível completar a caracterização, mas observamos umaumento no nível de mRNA nas cepas resistentes analisadas quando comparada com assensíveis. Não houve correlação entre a expressão da Tc52 e o fenótipo de resistência afármacos do T. cruzi. Nos testes de fármacos, as melhores resultados foram obtidos com aassociação Ravuconazol e Amiodarona: 60% de cura e 90% de sobrevivência doscamundongos infectados e tratados nas fases aguda e crônica. A associação entreAmiodarona e Benzonidazol não gerou efeito sinérgico ou aditivo na cura da doença deChagas experimental. O Tamoxifeno apesar de ter se mostrado potente nos testes in vitrofoi inativo in vivo. Com relação a avaliação da cooperação do sistema imune na atividadedo Posaconazol, nossos resultados mostraram uma nítida influência dos diferentes tipos delinfócitos na atividade desse fármaco assim como para o Benzonidazol. Provavelmente,esse efeito foi devido a ação preferencial desses fármacos sobre diferentes estágios doparasito, em cooperação com diferentes elementos do sistema imune. A utilização decamundongos knockout mostrou que a ausência de Interferon- reduziu a atividade doRavuconazol e Benzonidazol. O presente trabalho abre perspectivas para serem exploradas.

Influência de citocinas e células do sistema imune na atividade do inibidor da biossíntese de ergosterol (posaconazol) na infecção experimental pelo trypanosoma cruzi / Influence of citocinas and cells of the immune system in the activity of the inibidor of the biossintese of ergosterol (posaconazol) in the experimental infection by the trypanosoma cruzi

(...) Na tentativa de identificar novos fármacos para o tratamento da doença de Chagas, observou-se que o Trypanosoma cruzi necessita de ergosterol para a sua sobrevivência e seu crescimento. O parasito não pode utilizar o colesterol do hospedeiro e é sensível aos inibidores da biossíntese de ergosterol (IBEs). Os bis-triazóis são uma nova geração de IBEs, que foram ativos nas fases aguda e crônica da doença de Chagas experimental. Entre eles, o Posaconazol (POS) destacou-se, apresentando eficácia no combate ao T. cruzi “in vitro” e “in vivo”. O POS é uma droga candidata ao tratamento clínico da doença de Chagas. Nesta dissertação, nós avaliamos a atividade do POS em camundongos deficientes em populações de linfócitos (TCD4+, TCD8+, B) e citocinas (IFN-γ e IL-12), na tentativa de identificar se há influência de alguns efetores da resposta imune na eficácia terapêutica da droga. Os camundongos deficientes (knockouts) foram infectados com a cepa Y de T. cruzi (5000 tripomastigotas/camundongo) e foram tratados por 20 dias consecutivos. Para fins comparativos, camundongos deficientes também foram tratados com BZ, assim como camundongos selvagens C57Bl/6. A parasitemia foi realizada até 60 dias após a infecção, como descrito por Brener (1962). No mesmo período, a sobrevivência dos camundongos foi monitorada. Entre 30-40 dias após o término do tratamento, camundongos com parasitemia não detectáel ao microscópio óptico foram submetidos à hemocultura, para determinar a cura. Considerando a sobrevida e a cura dos camundongos knockouts infectados pelo T. cruzi, observamos que é necessária a interação entre o sistema imune do hospedeiro e as drogas estudadas, para que se obtenha cura parasitológica. Os linfócitos T CD4+ foram essenciais para a atividade do POS e BZ e a sua ausência torna os animais altamente suscetíveis. A citocina IFN-γ também foi essencial para o tratamento com BZ, porém, o POS foi menos influenciado por este componente. Os camundongos deficientes em linfócitos T CD8+ tiveram os melhores resultados quando tratados com BZ, ao contrário dos camundongos deficientes em linfócitos B que foram mais curados pelo POS. Nos camundongos deficientes em IL-12, o POS e o BZ tiveram a mesma atividade para reativação, mortalidade e cura. Os nossos resultados sugerem que ambas as drogas são influenciadas por componentes específicos do sistema imunológico. Porém, possuem mecanismos distintos de atuação e interação com o sistema imune